IPEC-J2細胞
貨號：GXCELL40005
產品說明
細胞系培養體系 所用完全培養基為 Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium(DMEM) 高糖，加入 10% FBS
產品描述
種 屬：豬(Sus scrofa)
組織來源：空腸(Jejunum)
疾 病：未知(Unknown)
年 齡：未知(Unknown)
性 別：未知(Unknown)
細胞形態：表皮細胞(Epithelial)
生 長 特性 ：貼壁生長 (Adherent)
拆包 & 存儲
1、請立即檢查包裝袋是否有破損或漏液
2、請立即將細胞培養瓶從包裝盒中取出，并按照下方操作步驟進行培養傳代
注意：如為凍存管，請收到后立即解凍培養。若來不及解凍，請儲存于液氮中(存儲于負 80度，會降低細 胞存活率)
培 養 瓶 中 細 胞 操 作 步 驟
對于貼壁培養的細胞，寄送前，我們會將培養基充滿整個培養瓶，以減少產品運輸過程中
貼壁細胞的脫落。
1、收到細胞產品后，請注意觀察是否有污染 。將培養瓶置于倒置顯微鏡下仔細檢查是否渾濁、是否細 菌污染。
因在運輸過程中存在顛簸，且有些細胞對溫度變化也很敏感，可能存在一些細胞脫落漂浮的情況，這些細胞仍是活細胞，
請勿丟棄，可離心富集后傳代使用。
2、對于貼壁的細胞，在生物安 全柜環境中，用真空泵去除培養瓶中的多余培養基，至剩余5-8 mL 左右，隨后將細胞置
于含有 5% CO2 的 37℃恒溫培養箱中培養，擰松瓶蓋。如果細胞已經長滿培養瓶，請立即傳代。
3、對于懸浮的細胞，在生物安 全柜環境中，轉移培養瓶中的細胞至離心管中，離心200×g/ 5 - 10 min，去除上清后，
用 5 mL 培養基吹散細胞，轉移至新的培養瓶中，隨后置于含有 5% CO2的 37℃恒溫培養箱中培養。
凍存細胞操作步驟
注意：為保存細胞的高存活率，請收到產品后，立即解凍培養。
1、將凍存管置于37℃ 水浴中來回晃動，迅速解凍。為避免污染，確保凍存管口置于水面之上。解凍需要迅速，大約2分鐘。
2、一旦凍存管中液體融化后，立即取出，采用 70%酒精噴拭凍存管表面。從此步開始，后續操作須在生物安全柜中完成。
3、將凍存管中的液體轉移到含有5mL完全培養基的離心管中，離心200×g / 5 - 10 min，用真空泵去除含有凍存液的上清。
4、用完全培養基重新懸浮細胞并轉移到新的培養瓶中。為保證細胞復蘇的存活率，請將培養基在37℃水浴預熱后使用。
5、將細胞置于含有5%CO,的37℃恒溫培養箱中培養。
貼壁細胞傳代培養
1、吸取并棄掉培養瓶中培養基，加入PBS清洗一次。
2、加入 1.0 mL 0.25(w/v)Trypsin-0.53mMEDTA溶液，并置于37C培養箱中孵育，直至細胞從壁上脫落分離。此過程大約需要
3至5分鐘(此處為12.5cm2培養瓶所用體積，可根據實際情況增減用量)。
3、加入2mL完全培養基中和胰蛋白酶，并輕輕吹打將細胞從培養瓶表面吹落，并使細胞分散。
4、離心200xg/5 min，去除上清后，取適量的培養基將細胞重懸，取適量懸液置于新的培養瓶中，并加入新鮮細胞完全培養基
至總體積為4mL。
5、將細胞置于含有5%CO,的37C恒溫培養箱中培養。
傳代比例:建議1:2至1:3(以培養瓶底面積計算)。
培養基換液: 每隔 2至 3天。
