GENRED 核酸染料(10,000× 水溶液)
貨號:G001
規格:0.5ml
GENRED核酸染料特點
1、 無毒性:GENRED 獨特的油性和大分子量特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內,艾姆斯氏試驗結果也表明,
該染料的誘變性遠遠小于EB。
2、 靈敏度高:適用于各種大小片段的電泳染色,對核酸遷移的影響小于SYBR Green I。
3、 穩定性高: 適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠;室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩定,耐光性強。
4、 信噪比高:樣品熒光信號強,背景信號低。
5、 操作簡單:與 EB 一樣,在預制膠和電泳過程中染料不降解;而電泳后染色過程也只需30 分鐘且無需脫色或沖洗,
即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。
6、適用范圍廣:可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;
可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。
7、 與 EB 有相同的光譜特性,無需改變濾光片及觀察裝置:標準的 EB 濾光片或 SYBR 濾光片都適用,使用與觀察
EB 相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可,在 300nm 紫外光附近可得到最佳激發。但是 GENRED 不能被 488 nm 氬離子
激光器或相似波長的可見光完全激發,因此不推薦使用此類激發裝置的成像系統。對于此類裝置,我們推薦您使用
GENGreen(Cat# 011或 012),它和 SYBR Green I的光譜相似,靈敏度相當,但更加穩定。
GENRED使用方法簡介
1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)
(1) 制膠時加入GENRED 核酸染料(例如:每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL GENRED10,000× 儲 液,以此比例類推)。
(2) 按照常規方法進行電泳。
注意事項:
1、此方法染色染料用量相對較少。500 μL染料大約可以做 100塊 50mL的膠。
2、 由于 GENRED 具有良好的熱穩定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉
以保證染料充分混勻。也可以選擇將 GENRED 儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備
瓊脂糖凝膠。GENRED兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
3、如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認問題是否與染料有關。如果染色后問題依舊存在,則說明
問題與染料無關,請嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時間以保證邊緣清晰;改進上樣技巧或選擇泡染法染色。
4、此方法不適合預制聚丙烯酰胺凝膠,對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。
2.泡染法
(1) 按照常規方法進行電泳。
(2) 用 H2O將 GENRED 10,000× 儲液稀釋約 3,300倍到 0.1M NaCl中,制成 3× 染色液。
(例如將 15μL GENRED10,000× 儲液和 5mL 1M NaCl加到 45mL H2O中)。
(3) 將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的 3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色 30min 左右,
最佳染色時間根據凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含 3.5~10%丙烯酰胺的凝膠,染色時間通常介于 30min 到 1h,
并隨丙烯酰胺含量增加而延長。
注意事項:
1、用泡染法染色時,染料用量較多。單次使用的染色液可重復使用 3次左右
2、 3× GENRED染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。
特別提醒:
1、 如果您使用的是紫外成像儀,請選擇 GENRED;如果您使用激光成像儀或希望在可見光下觀測,請選擇 GENGreen。
2、在極少數情況下,質粒經某些酶切后的 DNA 樣品會出現拖尾和分辨率降低,此時建議同時嘗試兩種染色方法以決定哪種方法更加合適。